Mfhb-1基因是在苜蓿体细胞胚胎发生初期通过扣除杂交方法获得的HD-Zip类转录因子基因。目前，以苜蓿47/15为材料，获得了正义、反义转化植株，即D3，携带有mfhb-1基因编码区的反向序列，为反义转化植株；F4，携带有mfhb-1基因编码区序列，为正义转化植株；C5，携带有mfhb-1基因的全长序列。
前期的研究结果表明，mfhb-1基因的过量表达对促进了苜蓿体胚的发生，反之则抑制苜蓿体胚的发生。为研究mfhb-1基因的生物学功能，初步阐明其在植物体胚发生过程中的调控机制，本研究以苜蓿D3、F4、C5以及未转化植株47/15为材料，采用双向电泳技术分析苜蓿不同转化植株体细胞胚胎发生早期过程中的差异表达蛋白并利用质谱技术对相关差异蛋白进行鉴定分析，其主要研究结果及结论如下：（1）采用TCA/丙酮沉淀法提取苜蓿体胚蛋白。你的微笑
双向电泳实验结果显示：TCA/丙酮沉淀法提取的苜蓿体胚蛋白经过纯化后，能够满足双向电泳的研究需要；（2）采用2-D Quant-kit试剂盒法进行蛋白定量。试剂盒法是一种简便而且精确的微量蛋白定量方法，所获得的标准曲线相关性高（R2=0.9951），质量可靠；（3）预实验我们采用7cm pH3-10范围胶条进行等电聚焦。
小宋佳的两任老公根据预实验的结果，第一向采用线性pH4-7长18cm的IPG胶条，第二向凝胶电泳采用13%的分离胶浓度对苜蓿体胚全蛋白进行分离，得到了较为满意的双向电泳图谱；（4）在3倍以上表达量差异标准下，与对照47/15相比，D3共有39个蛋白点发生变化，其中上调的蛋白点有17个，下调的蛋白点有5个，D3有而47/15无的蛋白点有12个，47/15有而D3无的蛋白点有5个；F4共有45个蛋白点发生变化，其中上调的蛋白点有20个，下调的蛋白点有7个，F4有而47/15无的蛋白点有9个，47/15有而F4无的蛋白点有9个；C5共有37个蛋白点发生变化，其中上调的蛋白点有7个，下调的蛋白点有9个，C5有而47/15无的蛋白点有11个，47/15有而C5无的蛋白点有10个；（5）选取47/15和F4的27对（个）3倍上调或者3倍下调的蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析，得到了13个阳性结果，其中与苜蓿质谱库中匹配上的有5个，1个为未知蛋白，7个为推定蛋白；（6）苜蓿数据库比对分析显示，F4相对于47/15上调的的蛋白点有：点21鉴定为电子传递黄素蛋白氧化酶，点276鉴定为磷酸核糖转移酶，点530鉴定为BTB和MATH结构域包含蛋白，点626鉴定为肌动蛋白；F4相对于47/15下调的的蛋白点有：点50鉴定为核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶小亚基。点682为未知蛋白，其余各点均为推定蛋白；（7）根据初步得到的蛋白信息，推测mfhb-1可能通过以下机制调控体胚的发育及生长。
天空之城吉他教学视频一方面，mfhb-1的表达产物可能会诱导与能量代谢有关的酶及细胞骨架蛋白的合成，促进苜蓿体胚的发育；另一方面，通过调控苜蓿体胚发生相关基因的上游调控转录因子的合成来调控体胚的发生。电子转移黄素蛋白脱氢酶的过量表达促进了ATP的合成，保证了体胚发生充足的能量供应，体胚数量增加；肌动蛋白的过量表达促进了细胞壁及细胞膜的重建；磷酸核糖转移酶的过量表达促进了核苷酸含量的增加，基因的合成及mRNA的转录加快，细胞的分裂及分化速度加快，体胚数量增加。
核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶在体胚发生过程中具有负向调节作用，消耗细胞内的有机物，细胞生长分化原料供应短缺，体胚数量降低；其他的如BTB和MATH结构域包含蛋白以及推定蛋白可能作为一种细胞周期调控因子参与体胚发生的调控。一些未知蛋白和推定蛋白的功能还需要进一步的研究。无限之城
综上所述，本研究初步鉴定了若干苜蓿体胚发生过程中的差异蛋白，并分析了mfhb-1基因的表达对苜蓿体细胞胚胎发生可能的分子调控机理。本研究为深入研究mfhb-1基因的生物学功能提供了基础数据，为进一步分离和鉴定苜蓿体胚发生过程中的蛋白提供参考，丰富和发展了体胚发生的分子遗传机制和调控网络的研究成果。
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