bca法测蛋白浓度标准曲线
明星片酬榜    bca法测蛋白浓度原理:在碱性环境中,蛋白质与cu2+络合并将cu2+还原成cu1+(biuretreaction)。bca与cu1+结合形成稳定的紫蓝复合物,在nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,可测定蛋白质浓度。因为蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一,承担着各种生物功能。
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    有关bca法测蛋白浓度的相关操作:1、按试剂盒说明书配置bca工作液。2、完全溶解蛋白质标准品,加到96孔板的蛋白标准品孔中,按照说明书要求对标品进行梯度释,加入bca工作液,用酶标仪测定其吸光度。3、以样品浓度为x轴,吸光度为y轴,绘制标准曲线。4、待测样品中加入bca工作液,测定吸光度,带入标准曲线中,计算样品浓度。除了bca法测蛋白浓度外,还有其他方法可以测试蛋白浓度。1、考马斯亮蓝法(bradford)法原理:考马斯亮蓝g-(coomassiebrilliantblueg-)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红,最大光吸收在nm。当它与蛋白质结合后变为青,蛋白质-素结合物在nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。2、斐林—酚试剂(lowry)法:斐林(folin)-酚试五百次的回眸歌词
剂法结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应,其中包括两步反应:第一步是在碱性条件下,与铜试剂作用生成蛋白质-铜络合物。第二步是此络合物将磷钼酸、磷钨酸试剂还原,生成磷钼蓝和磷钨蓝的深蓝混合物,颜深浅与蛋白含量成正相关,在nm波长下有最大光吸收。洪金宝资料
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