实验  Folin-Wu法定量测定血糖的含量
一、目的
1、掌握Folin－Wu法测定血糖含量的原理和方法。
2、学会制备无蛋白血滤液。
3i want you back、掌握7200型可见分光光度计的使用方法。
二、原理
    葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。其醛基具有还原性，与碱性铜试剂混合加热，葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧基,Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+（Cu2O）而沉淀。
    陈辰老公无蛋白血滤液中的葡萄糖和碱性硫酸铜溶液共热反应, Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝钼化合物—钼蓝 。
    血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。
可用比法定量的测定。
三、实验仪器
1、25mL血糖管×3支；       
2、血糖管橡胶塞×3个；
3、1mL胖肚吸管×1支；   
4、欧美民谣歌手100mL锥形瓶×2个；
5、漏斗架×1个；   
6、普通漏斗×2个；   
7、水浴锅×1个；
8、电炉×1个；       
9、移液管    1mL×2支; 2mL×3支;5 mL×2支;10 mL×1支;   
10、滤纸×1盒；   
11、吸耳球×2个；
12、7200型分光光度计×1台;
13、表面皿×1个
四、实验试剂
1、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml）
• (1)1%葡萄糖母液：称取1.000g葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至100ml。
• (2)葡萄糖标准液：取1.0ml葡萄糖母液于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。
2、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠10g，溶于蒸馏水并定容至100毫升。
3mp3视频下载、0.33mol/LH2SO4溶液：于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。
4、碱性硫酸铜溶液
•   A液：无水碳酸钠35g，酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水，稀释定容至1000ml.
•   B液：硫酸铜晶体5g，溶于蒸馏水并定容至100ml。
•   临用时，A液：B液=9：1混合（体积比），混合液于冰箱中保存（4℃）。   
5、酸性钼酸盐溶液：
称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入2000ml 的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水0.5ml，摇匀，静止数小时后取上清夜500ml，于1000ml容量瓶中，徐徐加入225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加25%硫酸150ml。
置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。然后加99%醋酸75ml，摇匀，用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕瓶中。
五、实验步骤
• 1、无蛋白血滤液的制备：
• 用奥氏吸管吸取全血（已加抗凝剂）1ml,缓缓放入100ml锥形瓶中，加蒸馏水7ml，摇匀，溶血后（血液变为红透明）加10%钨酸钠1ml，摇匀.。
• 再加0.33mol/L H2SO41ml，边加边摇，加毕充分摇匀，放置5～15分钟，至沉淀变为暗棕（如不变可再加0.33mol/L H2SO41-2滴）。
• 用干滤纸过滤。先倾入少许，待滤纸湿润后在全部倒入，如滤液不清需重新过滤。每毫升无蛋白血滤液相当于1/10ml全血。
2、血糖的定量测定：
取25ml的血糖管3支，编号。第一支血糖管中加入2ml蒸馏水（空白管）；第二支血糖管中加2ml标准葡萄糖液；用吸管吸取无蛋白血滤液2ml，放入第三支血糖管中。
然后向三支血糖管中各加入2ml新配制的碱性硫酸铜溶液，同时置于沸水浴中8分钟，取出，在流水中迅速冷却后,勿摇动，各加4ml酸性钼酸盐溶液。
一分钟后，用蒸馏水稀释至25ml，混匀，用7200分光光度计在420nm波长处比，以空白管调节零点。
六、实验结果
释永信和杨澜有染
测量次数/试剂编号
1
2
3
1
0．000
0.076
0.148
2
0．000
0.076
0.148
3
  0．000
0.076
0.148
成都黑帽吴施蒙事件
根据公式m=A1*C0/A0*1000
得全血中所含血糖质量为0.01947mg/ml
七、实验分析
实验过程中那些操作可能影响实验结果的准确性？
答：
1所取血液的量必需精确.假如由吸管中放出血液的速度太快,会有大量血液粘在吸管内壁,容量不准,所以普通放出1ml血液所用的时间不应少于1min.
2.沉淀由鲜红变为暗棕,是因钨酸钠与硫酸作用生成钨酸,在恰当酸度时,使血红蛋白变性,沉淀.如血沉淀放置后不变为棕红或重滤后仍混浊,可在钨酸与血混合液中参加10%硫酸1～2滴,待变为暗棕后再滤.
3．加硫酸、钨酸钠时，要边加边摇匀,使硫酸和钨酸钠充沛反响，从而完整沉淀蛋白质。
4.用定量滤纸过滤后应该得到完整廓清无之无蛋白血滤液。 假如得到仍带有红的血滤液则阐明蛋白质未被完整去除。
5. 过滤时应于漏斗上盖一外表皿，避免水分蒸发。
6.热水浴必需严厉控制在八分钟，然后用流水冷却，但制止摇动试管。
7.混匀的时分用大拇指抵住试管口，旋转试管一百八十度，重复若干次。
8.所用试管、漏斗均需干燥。