分光光度度计的详细解析
一，分光光度定义
分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区(2)400～760nm的可见光区,(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。
二，仪器组成
分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白
定量以及细菌生长浓度的定量。
仪器主要由光源、单器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。
三，光谱范围
包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200～400 nm的紫外光区.不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源.
钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400～760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红橙,黄绿,蓝靛,紫组成的连续谱;该谱可作为可见光分光光度计的光源.
氢灯（或氘灯）的发射光谱:氢灯能发出185～400 nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源.
物质的吸收光谱(1)
不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质.
物质的吸收光谱(2)
当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱.因为有一部分光在溶液的表面反射或分散董洁结婚照,一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液.
入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光
如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失则:
入射光 = 吸收光 十 透过光
四，原理
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。林玉英
单光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路
长度）成正比，其关系如下式：
A=-log(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度；
I。为入射的单光强度；
I 为透射的单光强度；
T 为物质的透射率；
k 为摩尔吸收系数；
L 为被分析物质的光程，即比皿的边长
c 为物质的浓度
物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式
计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显试剂或经过处理使其显后再测定,故又称比分析。由于显时影响呈深浅的因素较多，且常使用单光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。
五，仪器特点
av女星常仕欣 1、采用高性能优质光栅，波长精度更高；
2、采用进口钨灯，发光效率高，使用寿命长，功耗降低；
3、超大规模集成，T/A转换精度高，稳定性高；
4、微机系统的应用，使操作使用简单可靠。
六，技术参数
波长范围：320∽1000nm
光谱带宽：4nm
杂散光：≤0.5%（在360nm处）
波长准确度：优于±2nm
透射比准确度：≤±1nmT
七，常见的用途
薇娅是谁核酸的定量
核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30浮夸梁君诺μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。
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